Лечение привычного невынашивания и HLA-идентичности

Для преодоления проблемы привычного невынашивания и HLA-идентичности супружеской пары существует несколько видов терапии:
Иммунизация жены лимфоцитами мужа таким образом, чтобы антигенная нагрузка на иммунную систему женщины увеличивается в 10000 раз по сравнению с нормой; иммунотерапия препаратами гамма-глобулина человека.

Иммунизация жены аллогенными лимфоцитами мужа

Метод используется с конца 1970-х годов, на Западе впервые стал использоваться Фольком, у нас был впервые предложен Говалло и начал внедряться Сидельниковой.
(Говалло В.И., Сидельникова В.М. Иммунизация беременных женщин аллогенными лимфоцитами мужа как метод профилактики самопроизвольных выкидышей // Акуш. и гин. – 1983. – №12. – С. 25-27.) Метод заменил подсадку кожного лоскута мужа жене при невынашивании беременности ранее предложенный тем же автором.

Суть иммунизации.
Суть иммунизации жены аллогенными лимфоцитами мужа в том, что в результате сенсибилизации повышается эффективность узнавания HLA-антигенов мужа специфическими В-клетками эндометрия, которые начинают в достаточном количестве вырабатывать антитела против отцовских лейкоцитов (APLA) в процессе планцентации, что позволяет вовремя запустить механизмы сохранения беременности.

Показания к иммунизации жены аллогенными лимфоцитами мужа:
Привычное невынашивание, угрожающие выкидыши и спонтанные аборты
Идиопатическое бесплодие в супружеской паре с HLA-идентичностью (совпадение по 2-3 и более антигенам)

Регламент выполнения процедуры.
Подготовка мужа к процедуре такая же, как донора крови.
Работа только с такой кровью, которая проходит по критериям донорства.

Техника процедуры иммунизации.

1. Классическая процедура иммунизации по Говалло В.И..
Процедура была предложена для лечения привычного невынашивания у беременных женщин. Лимфоциты получали из венозной крови мужа в день введения. Для этого 100-150 мл крови забирали во флакон с нетоксичным для лимфоцитов гепарином, разливали кровь по пробиркам по 20 мл и на 30-45 минут оставляли в термостате при 37С в наклонном положении. Затем плазму с лейкоцитами отсасывали пастеровской пипеткой, помещали ее в центрифужные пробирки и центрифугировали 10 минут при 1500 об/минуту. Надосадочную жидкость удаляли, а осадок лейкоцитов, в котором было 90% лимфоцитов, ресуспендировали в 2 мл стерильного физиологического раствора. Пипеткой Сали забирали 0,02 мл взвеси клеток для подсчета количества лимфоцитов. Окончательная концентрация лимфоцитов в физиологическом растворе составляла 40-50 млн в 1 мл, процент живых лимфоцитов был не ниже 95. Клетки вводили сразу после приготовления суспензии в дозе 30-120 млн в 2 мл физиологического раствора подкожно в несколько точек (по 0,1 мл суспензии в 20 точек межлопаточной области) однократно в сроки от 5 до 9 недель беременности.

 2. Процедура иммунизации по материалам W.Matzner, P.Chong, G.Xu, W.Ching (Am J Reprod Immunol; vol. 33, 1995; pp 10-13)
Процедура предложена для лечения HLA-идентичности у супружеских пар с  идиопатическим бесплодием, а также для профилактики  привычного невынашивания у небеременных  женщин. Производили забор венозной крови мужа. Добавляли буферный раствор Ficoll-Hypaque и центрифугировали. Мононуклеарные лейкоциты отделяли и обрабатывали раствором хлорида аммония для лизиса оставшихся эритроцитов. Тромбоциты вымывали (троекратно) с помощью солевого раствора Hank’s Balance.
Самое главное при процедуре иммунизации лимфоцитами мужа – это качество отмывки лимфоцитов. Важно, чтобы не было примеси эритроцитов и тромбоцитов в приготовленной суспензии.

Методики лечения

Классическая методика по Говалло предполагает однократную процедуру.
40 миллионов клеток вводили внутрикожно в шесть точек предплечья. Иммунизация лимфоцитами мужа развивается обычно в течение 4 недель, и процедуру повторяют. Через месяц после второй иммунизации измеряют уровень APLA  для оценки ответа материнского организма. Если он значительно повышается перед зачатием, то успешное вынашивание достигает 80%. Если ответ был ниже ожидаемого, вводили еще 80 миллионов отцовских клеток. Пары были предупреждены о возможности отмены контрацепции только при положительном уровне антител. При необходимости иммунизацию повторяли в середине второго триместра.
По другой методике количество вводимых лимфоцитов должно быть не менее 250 миллионов. Сроки проведения процедур те же.
Курс плановых иммунизаций вне беременности включает 5-6 введений лимфоцитов мужа с интервалами в 2-3 недели. Эффективность иммунизации оценивается по нарастанию в крови женщины факторов, блокирующих реакции клеточного иммунитета.

Осложнения иммунизации.
Развитие анафилактических реакций на лимфоциты.
Инфицирование вирусами ВИЧ, ЦМВ, ВПГ, гепатита В и С
В последнее время для иммунизации женщин стали использовать иммуноглобулин для внутривенного введения, которые блокируют киллерные клетки матери в отношении плода.